Xylitol concentrations in artificial saliva after application of different xylitol dental varnishes.

OBJECTIVE: The present study analyzed xylitol concentrations in artificial saliva over time after application of varnishes containing 10% and 20% xylitol. MATERIAL AND METHODS: Fifteen bovine enamel specimens (8x4 mm) were randomly allocated to 3 groups (n=5/group), according to the type of varnish used: 10% xylitol, 20% xylitol and no xylitol (control). After varnish application (4 mg), specimens were immersed in vials containing 500 µL of artificial saliva. Saliva samples were collected in different times (1, 8, 12, 16, 24, 48 and 72 h) and xylitol concentrations were analyzed. Data were assessed by two-way repeated-measures ANOVA (p<0.05). RESULTS: Colorimetric analysis was not able to detect xylitol in saliva samples of the control group. Salivary xylitol concentrations were significantly higher up to 8 h after application of the 20% xylitol varnish. Thereafter, the 10% xylitol varnish released larger amounts of that polyol in artificial saliva. CONCLUSIONS: Despite the results in short-term, sustained xylitol releases could be obtained when the 10% xylitol varnish was used. These varnishes seem to be viable alternatives to increase salivary xylitol levels, and therefore, should be clinically tested to confirm their effectiveness.

Xylitol concentrations in artificial saliva after application of different xylitol dental varnishes

OBJECTIVE: The present study analyzed xylitol concentrations in artificial saliva over time after application of varnishes containing 10% and 20% xylitol. MATERIAL AND METHODS: Fifteen bovine enamel specimens (8x4 mm) were randomly allocated to 3 groups (n=5/group), according to the type of varnish used: 10% xylitol, 20% xylitol and no xylitol (control). After varnish application (4 mg), specimens were immersed in vials containing 500 µL of artificial saliva. Saliva samples were collected in different times (1, 8, 12, 16, 24, 48 and 72 h) and xylitol concentrations were analyzed. Data were assessed by two-way repeated-measures ANOVA (p<0.05). RESULTS: Colorimetric analysis was not able to detect xylitol in saliva samples of the control group. Salivary xylitol concentrations were significantly higher up to 8 h after application of the 20% xylitol varnish. Thereafter, the 10% xylitol varnish released larger amounts of that polyol in artificial saliva. CONCLUSIONS: Despite the results in short-term, sustained xylitol releases could be obtained when the 10% xylitol varnish was used. These varnishes seem to be viable alternatives to increase salivary xylitol levels, and therefore, should be clinically tested to confirm their effectiveness.

Recovery of silver residues from dental amalgam

Dental amalgam residues are probably the most important chemical residues generated from clinical dental practice because of the presence of heavy metals among its constituents, mainly mercury and silver. OBJECTIVE: The purpose of this study was to develop an alternative method for the recovery of silver residues from dental amalgam. MATERIAL AND METHODS: The residue generated after vacuum distillation of dental amalgam for the separation of mercury was initially diluted with 32.5 percent HNO3, followed by precipitation with 20 percent NaCl. Sequentially, under constant heating and agitation with NaOH and sucrose, the sample was reduced to metallic silver. However, the processing time was too long, which turned this procedure not viable. In another sequence of experiments, the dilution was accomplished with concentrated HNO3 at 90ºC, followed by precipitation with 20 percent NaCl. After washing, the pellet was diluted with concentrated NH4OH, water and more NaCl in order to facilitate the reaction with the reducer. RESULTS: Ascorbic acid was efficiently used as reducer, allowing a fast reduction, thus making the procedure viable. CONCLUSIONS: The proposed methodology is of easy application and does not require sophisticated equipment or expensive reagents.

Associação de tetraciclina à membrana de osso cortical bovino desmineralizado aumenta atividade de enzimas lisossomais / Association of tetracycline and membrane of demineralized bovine cortical bone increase lysosomal enzyme activity

A regeneração tecidual e óssea guiadas utilizando membranas (M) à base de colágeno é usual. A tetraciclina é utilizada algumas vezes para auxiliar a regeneração tecidual na forma tópica ou associada às barreiras absorvíveis, contudo acelerando a degradação da membrana. Enzimas lisossomais estão envolvidas na resposta celular a biomateriais. O objetivo deste estudo é avaliar o efeito da associação da tetraciclina à membrana derivada do osso cortical bovino desmineralizado (MT) na atividade de enzimas lisossomais. As membranas (M e MT) foram implantadas no tecido subcutâneo de ratos (n = 120) e 1, 3, 7, 14, 28 e 60 dias após a cirurgia os animais foram mortos e os respectivos tecidos reacionais coletados para análise bioquímica. O lisado do tecido foi obtido em tampão acetato 0,1 M, pH 5, contendo EDTA e β-mercaptoetanol 1 mM para a determinação da atividade das isoformas da fosfatase ácida, fosfatase alcalina de membrana e arilsultase e β-hexosamidase. No grupo MT observou-se maior atividade das enzimas lisossomais nos períodos de 1, 3 e 7 dias (p < 0,05). Os resultados obtidos permitem concluir que a associação de tetraciclina à membrana aumenta a atividade específica das enzimas analisadas, concorrendo para a aceleração da degradação da membrana + tetraciclina.

Guided bone and tissue regeneration using collagen-derived membranes (M) is a common practice. Topical application of tetracycline or its association to membranes intends to complement guided tissue regeneration, however, accelerated degradation was observed. Lysosomal enzymes are involved in the cell response to biomaterials. The aim of this work was to evaluate the effect of tetracycline association to the membrane (MT) obtained from demineralized bovine cortical bone to lysosomal enzymes. Membranes (M and MT) were implanted in the subcutaneous tissue of rats (n=120) 1, 3, 7, 14, 28 and 60 days after implantation the animals were killed and the granuloma removed for enzymatic analysis. Tissue lyses was obtained using 0.1M acetate buffer, pH 5.0, plus 1 mM of EDTA and β-mercaptoethanol for determination of acid phosphatase isoforms, cell membrane alkaline phosphatase, arilsulfatase and β-hexosaminadase activities. MT group showed higher lysosomal activity at 1, 3 and 7 days (p<0.05) than M group. Based on the results it could be concluded that the treatment of membranes with tetracycline significantly altered the specific activity of the enzymes, increasing MT degradation in the tissue.

Marcadores bioquímicos e microscópicos como ferramentas investigativas da resposta tecidual envolvidas com a associação de osso cortical bovino/colágeno em subcutâneo de ratos / Biochemical and microscopic analyses as investigative tool of tissue response involved with the association of bovine cortical bone/collagen in subcutaneous of rats

O objetivo deste trabalho foi avaliar a reposta tecidual à associação de osso bovino inorgânico e colágeno bovino liofilizado, implantados em subcutâneo de ratos. O composto (osso bovino + colágeno) foi acondicionado em cápsulas de colágeno transparente e posteriormente implantado no tecido conjuntivo subcutâneo de ratos. Os animais foram mortos após 10, 20, 30 e 60 dias da cirurgia e as peças recolhidas para análise microscópica e enzimática. Foram analisados os aspectos microscópicos da resposta tecidual, bem como a atividade específica da fosfatase ácida total, fosfatase ácida lisossomal, fosfatase ácida de baixa massa molecular, fosfatase ácida resistente ao tartarato (marcador de osteoclastos e alguns tipos de células gigantes multinucleadas) e da fosfatase alcalina. A análise enzimática mostrou que a atividade da fosfatase ácida lisossomal coincidiu com os períodos de maior presença de células gigantes multinucleadas inflamatórias. A análise microscópica revelou um moderado infiltrado inflamatório apenas no período de 10 dias, desaparecendo nos períodos seguintes. A presença de linfócitos e plasmócitos foi leve, sendo notada apenas no período de 10 dias. O grau de fibrosamento tendeu de moderado a intenso até o final do experimento. Dentro dos limites deste trabalho pode-se concluir que a combinação de osso cortical bovino + colágeno bovino liofilizado é biocompatível não exibindo sinais de resposta imunogênica, além disso, a atividade das fosfatases ácidas pode ser modulada em função do tempo, durante a resposta tecidual ao composto implantado em subcutâneo de ratos. O exato papel de cada uma dessas enzimas nesta complexa cadeia de eventos deve, ainda, ser investigado.

The objective of this work was to evaluate the rat tissue response under association of inorganic bovine bone and bovine collagen. Before experimentation, the association (bovine bone + collagen) was conditioned in collagen capsules and after implanted in rats subcutaneous tissue. Afterwards, the animals were killed as follows: 10, 20, 30 and 60 days after surgery. Immediately, the biopsies were collected and appropriately conditioned for both microscopic and biochemical analysis. The biochemical parameters evaluated were: specific activity of total acid phosphatase, lisossomal acid phosphatase, low molecular weight phosphatase, tartarateresistant acid phosphatase and of alkaline phosphatase. These results showed that lisossomal acid phosphatase activity coincided with the periods of bigger incidence of inflammatory multinucleated giant cells. Results from microscopic analysis showed a moderate infiltrated inflammatory at 10 days, decreasing at the following periods. Also, the presence of lymphocytes and plasmocytes was scored as light at 10 days. We found that fibrosis degrees were between moderate to intense at the final periods. Taken together, our results showed that association of cortical bovine bone plus bovine collagen is biocompatible by not showing signals of immune response. On the other hand, both acid and alkaline and phosphatase activities were modulated along the periods evaluated as responsive events.

Optimizing the procedure for mercury recovery from dental amalgam.

Mercury, as any other heavy metal, may cause environmental damages due to its accumulation and biotransformation. Dental offices, whether private or institutional, use dental amalgam as a restorative material on a daily basis. Dental amalgam is composed of mercury (50%), silver (30%) and other metals. Approximately 30% of the amalgam prepared in dental offices (0.6 g per capsule) are wasted and inadequately discarded without any treatment. Methods for mercury recovery have been proposed previously, using high temperatures through exposure to direct flame (650 degrees C), long processing time, and hazardous reagents as potassium cyanide. The purpose of this study was to develop a method to replace the direct flame by an electrical mantle in the process of mercury recovery. Results showed an average mercury recovery of 90% from 2 kg of amalgam after 30 minutes of processing time, thus optimizing the procedure. The proposed modifications allowed a significant reduction in processing time and a mercury recovery with high purity. The modified process also provided minimization of operator exposure to physical, chemical and ergonomic hazards, representing a technological advance compared to the risks inherent to the original method. It also provided environmental health and economy of energy resources by replacing a finite energy source (fossil and organic) by a more environmentally appropriate electric source, resulting in significant improvement of the procedure for mercury recovery from dental amalgam.

Optimizing the procedure for mercury recovery from dental amalgam

Mercury, as any other heavy metal, may cause environmental damages due to its accumulation and biotransformation. Dental offices, whether private or institutional, use dental amalgam as a restorative material on a daily basis. Dental amalgam is composed of mercury (50 percent), silver (30 percent) and other metals. Approximately 30 percent of the amalgam prepared in dental offices (0.6 g per capsule) are wasted and inadequately discarded without any treatment. Methods for mercury recovery have been proposed previously, using high temperatures through exposure to direct flame (650°C), long processing time, and hazardous reagents as potassium cyanide. The purpose of this study was to develop a method to replace the direct flame by an electrical mantle in the process of mercury recovery. Results showed an average mercury recovery of 90 percent from 2 kg of amalgam after 30 minutes of processing time, thus optimizing the procedure. The proposed modifications allowed a significant reduction in processing time and a mercury recovery with high purity. The modified process also provided minimization of operator exposure to physical, chemical and ergonomic hazards, representing a technological advance compared to the risks inherent to the original method. It also provided environmental health and economy of energy resources by replacing a finite energy source (fossil and organic) by a more environmentally appropriate electric source, resulting in significant improvement of the procedure for mercury recovery from dental amalgam.

Avaliação bioquímica de xenoimplantes em subcutâneo de rato / Biochemical analysis of xenografts implants in rat subcutaneous

O objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial das fosfatases ácidas como biomarcadores da resposta tecidual ao implante de osso medular inorgânico bovino. Cápsulas de colágeno foram utilizadas como carreadores de partículas macro (1000 a 2000 µm) e microgranulares (200 a 600 µm) e implantados em subcutâneo de 60 ratos Wistar, divididos aleatoriamente em 3 grupos: Grupo I (cápsula de colágeno vazia), Grupo II (macrogranular) e Grupo III (microgranular). Decorridos 10, 20, 30 e 60 dias pós-cirúrgico, os animais foram mortos para a remoção do tecido reacional de onde se obteve o extrato. As atividades específi cas (AE) das fosfatases ácidas total (FAT), lisossomal (FAL) e a de baixo peso (FABMr)foram realizadas no pH 5,0 utilizando o p-nitrofenilfosfato como substrato, na presença de inibidores específi cos para cada enzima; a atividade tirosina (Tyr-P) fosfatase foi obtida nas mesmas condições utilizando a tirosina fosfato comosubstrato. No Grupo I observou-se que a atividade da FAT e FAL não variaram signifi cativamente ao longo dos períodos experimentais, entretanto ambas as enzimas apresentaram atividades signifi cativamente maior (p<0,05) no grupo II que no grupo III na maioria dos períodos avaliados. A FABMr no grupo I foi menor (p<0,001) que nos grupos II (aos 10 e 30 dias) e III (aos 10 dias), mas nos períodos de 20 e 60 dias a FABMr foi maior (p<0,001). A Tyr-P detectada nos períodosde 20 e 60 dias era cerca de 18 vezes maior que aos 10 e 30 dias. Concluiu-se que a atividade da fosfatase ácida total, e suas isoformas FAL, FABMr e Tyr-P é signifi cativamente modulada durante a resposta tecidual ao implante de osso medular inorgânico bovino, tanto em função do período como do tamanho da partícula.

Reação tecidual e perfil de fosfatases após o implante de matriz óssea desmineralizada xenogênica em músculo de ratos / Tissue reaction and phosphatases profile after implant of xenogenic demineralized bone matrix in rat muscle

Neste estudo correlacionou-se o perfil da atividade das fosfatases ácidas com os aspectos histológicos do tecido reacional em resposta à implantação subcutânea de biomaterial de enxerto preparado com matriz óssea desmineralizada bovina. Cinqüenta ratos Wistar machos foram submetidos a implantação do enxerto e sacrificados após 7, 14, 21, 30 e 67 dias. As biópsias obtidas foram fixadas em formalina 10% em tampão fosfato e cortes histológicos de 6 µm de espessura foram corados com hematoxilina e eosina. As atividades enzimáticas específicas (AE) das fosfatases ácidas foram determinadas utilizando-se o p-nitrofenilfosfato (pNFF) como substrato em tampão acetato, pH 5,0, e inibidores específicos. Para a fosfatase alcalina (FALc) foi utilizado o pNFF em tampão glicina, pH 9,2, contendo CaCl2. A análise histológica mostrou infiltrado inflamatório crônico com predomínio de macrófagos e linfócitos e presença de células gigantes multinucleadas,reabsorção do enxerto ao longo do tempo, estando ausente aos 67 dias; não pode ser observada formação óssea heterotópica. A atividade da fosfatase ácida total foi elevada e constante entre 7 e 30 dias, cerca de 30,0 nmol min-1mg-1, decaindo, em seguida, para 6,9 nmol min-1mg-1, enquanto a atividade da fosfatase alcalina foi baixa, com valor máximo de 6,0 nmol min-1mg-1 aos 30 dias. As atividades PTP, FAL e TRAP corresponderam, respectivamente, a cerca de 70, 25 e 10% da FAT. Concluímos que o enxerto de matriz óssea bovina desmineralizada não induziu a osteogênese heterotópica e que as fosfatases ácida e alcalina participaram da resposta tecidual, sendo moduladas em função do tempo

Fluorine content of several brands of chocolate bars and chocolate cookies found in Brazil

Chocolate bars and chocolate cookies are foodstuffs highly appreciated by children. The possibility of having fluorine (F) among their components, associated with an excessive consumption, may make them decisive contributors to the total daily F intake. Thus, they could participate in the establishment of dental fluorosis. The aim of this study was to analyze the fluorine concentration [F] of the chocolates bars (CB) Baton, Confeti, Garoto Ball, Kinder Ovo, M&MÆs, Milkybar, Nescau, Nescau Ball, Surpresa, Surpresa Bichos, Tortuguita; and of the chocolate cookies (CC) DanytÆs, Hipopó, Nescau, Passatempo, Pokémon, Sítio do Pica-Pau Amarelo and Trakinas. Samples were purchased in Bauru, Säo Paulo, Brazil. Three grams of each product were previously ashed at 525°C (CB and cookies fillings) and at 550°C (cookies dough), during 4 hours. Fluorine was separated from the ash by hexamethyldisiloxane (HMDS)-facilitated diffusion. Fluorine analysis was carried out with the specific electrode. Mean [F]s ± SD and amplitude (unit mg/g) were: CB = 0.30 ± 0.45 (0.07 - 1.60, n = 12) and CC = 1.08 ± 2.64 (0.04 - 7.10, n = 7). It was concluded that some of the analyzed foods may be important contributors to the total daily F intake. As for the product that had the highest [F] (DanytÆs), when only 3 units are consumed just once a day, they may supply up to 40 percent of the maximum recommended daily F intake (0.07 mg/kg body weight) for a 2-year-old child (12 kg). The [F] in these products should be informed on their labels

Modificaçöes na atividade de fosfotirosina proteína fosfatase e fosfatase acída em glândula sublingual e fígado de ratos expostos à fumaça de cigarro / Effect of cigarette smoke on sublingual gland liver phosphotyrosine protein phosphatase and acid phosphatase activities

O fumo voluntário e involuntário influencia a saúde geral. Têm-se sugerido ligaçöes entre o hábito de fumar dos pais e a experiência de cáries em crianças. Estudos recentes demonstraram um aumento do estresse oxidativo em diversos tecidos de indivíduos expostos à fumaça do cigarro (FC). Neste trabalho analisamos o efeito da FC na atividade específica da fosfatase ácida total (FAT), fosfatase ácida inespecífica (FAI) e proteinas tirosina fosfatase (PTP) em diversos tecidos de ratos expostos à FC ambiental. Foram utilizados 49 ratos Wistar (Rattus novergicus) machos adultos (200g), divididos aleatoriamente em grupo controle (näo exposto à FC) e experimental. O grupo experimental foi exposto 3 vezes ao dia à fumaça produzida por 10 cigarros (1 cigarro: alcaträo=11mg; nicotina=0,9mg; monóxido de carbono=12mg), durante 10 minutos. Os animais foram sacrificados após 0, 25, 50 e 75 dias. A atividade fosfatásica (nmol/min mg) foi determinada no extrato solúvel dos tecidos analisados, utilizando 5 mM de pNPP como substrato no pH 5 e 37ºC. Na glândula sublingual ocorreu um aumento de cerca de 2x na FAT e FAI e 3,5 vezes na PTP após 25 dias; após 50 dias a atividade FAT e PTP foi menor que 50 por cento em relaçäo ao grupo controle, mantendo-se neste patamar após 75 dias. No fígado, após 25 dias, ocorreu um aumento de cerca de 500 por cento na FAT, PTP e FAI; após 50 dias houve marcante diminuiçäo (75 por cento) na atividade dessas enzimas. A sensibilidade das diferentes isoformas da fosfatase ácida à FC a coloca como potencial biomarcador das alteraçöes induzidas pela exposiçäo à fumaça de cigarro ambiental. Concluímos que a exposiçäo crônica à FC promove marcante diminuiçäo da atividade fosfatase ácida e PTP na glândula salivar sublingual e no fígado de ratos. A inibiçäo da PTP poderia ser o início de modificaçöes moleculares relacionadas a algumas doenças associadas ao cigarro uma vez que essa classe de enzimas desempenha papel fundamental no controle da proliferaçäo, crescimento e diferenciaçäo celular

Avaliaçäo microscópica e bioquímica da resposta celular a enxertos de osso cortical bovino em subcutâneo de ratos: efeito do tamanho da partícula / Microscopic and biochemical analysis of the cellular response to cortical bovine grafts implanted in rat subcutaneous: effect of particle sizes

Esse trabalho teve o propósito de avaliar comparativamente a resposta celular em subcutâneo de ratos ao enxerto de osso cortical bovino desproteinizado a 100ºC (Gen-Ox(R), Baumer S.A.), na forma microgranular (250-1000 mm) e macrogranular (1000-2000 mm). Após 10, 20, 30 e 60 dias da implantaçäo dos materiais, os animais foram sacrificados e as peças histológicas removidas. A análise microscópica mostrou para ambos os materiais uma reaçäo granulomatosa tipo corpo estranho de baixa renovaçäo contendo macrófagos e células gigantes multinucleadas em contato com o material. A partícula microgranular induziu uma resposta celular pouco mais exuberante após 10 dias da implantaçäo, diferença que näo foi mais observada após 60 dias. A análise bioquímica näo acusou diferenças substanciais entre os grupos testados; a atividade específica da fosfatase ácida total foi mais acentuada no início do processo em resposta à forma microgranular, mas praticamente igualou-se ao grupo macrogranular depois de 60 dias. Podemos concluir que o osso cortical bovino desproteinizado a 100ºC, quer macro ou microgranular promoveu resposta tecidual semelhante à descrita para implantaçäo subcutânea de osso autógeno ou alógeno mineralizado, sugerindo que possa ser usado como material de preenchimento osteosubstituto e como potencial carreador das proteínas morfogenéticas do osso

Efeito da temperatura de desproteinizaçäo no preparo de osso cortical bovino microgranular: avaliaçäo microscópica e bioquímica da resposta celular em subcutâneo de ratos / Effect of deproteinization temperature on the preparation of microgranular bovine cortical bone: microscopic and biochemical analysis in rat subcutaneous tissue

Nosso propósito foi avaliar a biocompatibilidade de dois materiais preparados com osso cortical bovino, um desproteinizado a 100ºC (Gen-Ox(R), Baumer S.A.) e outro a 1000ºC (preparado no laboratório de Bioquímica, FOB-USP). Esses materiais foram implantados em subcutâneo de ratos e, após 10, 20, 30 e 60 dias, os animais foram sacrificados e as peças histológicas removidas. As análises microscópicas mostraram uma reaçäo granulomatosa tipo corpo estranho de baixa renovaçäo contendo macrófagos e células gigantes multinucleadas em contato com o material, semelhante à implantaçäo subcutânea de osso autógeno ou alógeno mineralizado. Ao final do período experimental näo houve diferença significativa nos níveis das fosfatases ácidas nos grupos que receberam o osso cortical desproteinizado a 100 ou 1000ºC, mostrando que näo há diferença significativa entre os materiais testados. Podemos concluir que o osso cortical bovino, quer desproteinizado a 100ºC (Gen-Ox(R), Baumer S.A.) ou a 1000ºC (preparado em nosso laboratório) podem ser usados como material de preenchimento osteo-substituto e como potenciais carreadores das proteínas morfogenéticas do osso

Reparo de defeito ósseo perene em crânio de cobaia pela aplicação de osseobond / Repair of bone defect perennial in guinea pigs skull to osseobond application

Na presente pesquisa avaliamos o potencial do Osseobond (matriz óssea bovina desmineralizada) no reparo de defeitos ósseos perenes provocados em crânios de cobaias. Um total de 24 defeitos ósseos de 8 mm de diâmetro foi produzido com trefina cirúrgica na calvária de 12 cobaias machos e adultos. Em cada animal, um defeito foi preenchido com partículas de Osseobond aglutinadas com sangue do próprio animal e outro com coágulo sanguíneo. As calvárias de grupos de 4 cobaias, foram coletadas após 1, 3 e 6 meses. Os espécimes descalcificados foram processados e cortes histológicos semi-seriados de 6 um foram obtidos. A análise histológica indicou que: a) todos os defeitos ósseos preenchidos somente com coágulo sangüíneo estavam totalmente abertos e continham tecido conjuntivo fibroso; e b) nos defeitos ósseos preenchidos com Osseobond, as partículas foram reabsorvidas, em quase sua totalidade já após 3 meses. Aos 6 meses de espaço da lesão estava totalmente ocupado por tecido ósseo em estado avançado de organização; em um caso desse grupo, permaneceu uma pequena abertura lateral. O processo de reabsorção da matriz óssea liofilizada de reparo ósseo foi acompanhado pela análise histológica